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Vol. 12. Núm. 3.
Páginas 209 (Enero 2001)
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Vol. 12. Núm. 3.
Páginas 209 (Enero 2001)
DOI: 10.1016/S1130-1473(01)70729-4
8. Metodología de estudio de quimiosensibilidad en cultivos primarios de tumores cerebrales
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J.L. Gil-Salú, M. López-Escobar, E. Gómez- Cárdenas, F. Rodríguez-Peña, F. García-Vázquez
Servicio de Medicina Interna. Unidad Oncológica. Hospital Clínico de Puerto Real. Cádiz
L. Domínguez*, J. Requena**, E. Maestro**, J. Bosco López***
* Servicio de Neurocirugía, unidad de investigación
** Servicio de Bioquímica. Hospital Universitario Puerta del Mar. Cádiz
*** Servicio de Anatomía-patológica. Hospital Universitario Puerta del Mar. Cádiz
Información del artículo
Introducción

Los estudios de quimiosensibilidad in vitro en tumores cerebrales tienen como banco de pruebas el empleo de cultivos celulares. Estos pueden obtenerse a partir del explante de un tumor cerebral intervenido quirúrgicamente o bien a partir de líneas de cultivo tumorales. Los primeros tienen como ventaja la de reproducir in vitro las caraterísticas de cada paciente del que se obtienen (cultivo primario).

Material y método

Hemos obtenido cultivos primarios a partir de 30 tumores cerebrales de estirpe glíal y mesenquimal de pacientes intervenidos en el Servicio de Neurocirugía de nuestro Centro desde Septiembre de 1999 hasta Diciembre de 2000. Las muestras explantadas eran procesadas en la Unidad de Investigación empleando DMEM con 10% de suero ternera fetal, glutamina y antibiótico como medio de cultivo en frascos de Roux y manteniendo los cultivos a 37°C en cámara humidificada con una atmósfera con 5% de C02. Cuando obteníamos confluencia celular los cultivos eran tripsinizados y las células transferidas a frascos de 36 ó 64 miniplacas, empleando una de ellas para estudio inmunohistoquímico y la otra para estudios de quimiosensibilidad mediante MTT (test de methythiatol retracolium.)

Resultados

Hemos mejorado características y condiciones en el estudio de los cultivos primarios obtenidos a partir de tumores cerebrales de estirpe glial y mesenquimal, reflejando algunas particularidades de dicho proceso y los tiempos válidos para su obtención. Asimismo presentamos los estudios inmuno-histoquímicos obtenidos en material parafinado y los correspondientes al cultivo primario de cada tumor, observando cómo la expresividad PAGF, S-100 y vimentina se expresan en ambos de forma similar. Por último hemos probado mediante técnica de MTT la quimiosensibilidad a hidroxiureas en el caso de los meningiomas y estamos obteniendo los resultados preliminares de quimiosensibilidad en los gliomas anaplásicos y glioblastomas con BCMU.

Conclusiones

Los cultivos primarios obtenidos del explante de tumores gliales y mesenquimales intervenidos en el Servicio de Neurocirugía se muestran como un método individualizado para cada paciente que nos permite observar sus características de expresividad inmunohistoquímica pudiéndose probar in vitro la respuesta a fármacos mediante estudios de quimiosensibilidad por MTT. Dichos cultivos primarios son un excelente banco de pruebas para poder ofrecer tratamientos complementarios a la cirugía mediante fármacos existentes en el arsenal actual de quimioterápicos o los nuevos fármacos que van surgiendo de forma individual para cada paciente.

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